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R&D Systems 检测细胞凋亡试剂盒常见问题解答

【 日期:2013-8-9 15:36:54  |  浏览次数:4187 】

答:R&D SystemsCaspase活性测定试剂盒可作为半定量测试。检测结果最好用于测量在细胞凋亡细胞中与未经诱导细胞中的Caspase活性倍数的增加。实验时,最好采用本底对照(无细胞裂解液或无底物的反应)。如果本底对照也有一定的读数,这一读数应当在记算倍数增加之前从试验数据中差减。

问:Caspase活性检测同Caspase ELISA试剂盒有何不同?

答:Caspase活性检测用于测定不同Caspase的蛋白酶的活性,表达为比未诱导样本的倍数增加。Caspase ELISA试剂盒用于测定不同Caspase在样本中的含量,以pg /mL定量表达。

问:caspase X 活性测试是对caspase X专一的吗?

答:大多数caspase会裂解所有的底物,它们根据Michaelis-Menton动力学趋于选择某一底物而非另一底物,但没有任何底物是对某一Caspase专一的。比如,Caspase 3Caspase 7都可裂解DEVD底物;Caspase 945 都可裂解LEHDR&D Systems为每一Caspase选择了它所适宜的底物。如果反应进行的太久,一些Caspase会激活另一些Caspase

问:Caspase活性检测试剂盒中的细胞裂解液是否同其它试剂盒中的一样?

答:所有的Caspase活性检测试剂盒中的细胞裂解液都是一样的。所以,可用它裂解细胞,和用于多种Caspase活性的测试。

问:R&D SystemsCaspase抑制剂是否可逆?

答:所有R&D SystemsCaspase抑制剂在N端有苯甲氧碳基(Z-)FMK功能组,它们可穿孔细胞,是不可逆转的。

问:R&D Systems是否为Caspase活性检测提供阳性对照?

答:R&D Systems提供多种重组Caspase酶,它们是理想的阳性对照。如果试验者自己想建立一阳性对照,有许多可以产生细胞凋亡的阳性对照的方法都已发表。如果将细胞同2 mM星形孢菌素(Staurosporin)温育2小时,可诱导绝大多数细胞类型进入细胞凋亡。R&D Systems有文献资料列举了对Caspase如何产生阳性对照,可向R&D Systems的技术服务索取。

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